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使用葉綠素測(cè)定儀如何進(jìn)行實(shí)驗(yàn)

更新時(shí)間：2019-06-04瀏覽：965次

　　葉綠素測(cè)定儀是用來(lái)測(cè)量葉綠素含量的儀器，葉綠素測(cè)定儀測(cè)量時(shí)間快速，LCD直接顯示葉綠素值，30個(gè)數(shù)據(jù)，自動(dòng)計(jì)算并顯示平均值。

　　實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備

　　（一）材料：新鮮（或烘干）的植物葉片。

　　（二）儀器設(shè)備：1. 分光光度計(jì)；2. 電子頂載天平（感量0.01g）；3. 研缽；4. 棕色容量瓶；5. 小漏斗；6. 定量濾紙；7. 吸水紙；8. 擦境紙；9. 滴管。

　　（三）試劑：96%乙醇（或80%丙酮）；石英砂；碳酸鈣粉。

　　實(shí)驗(yàn)步驟

　　1. 取新鮮植物葉片（或其它綠色組織）或干材料，擦凈組織表面污物，剪碎（去掉中脈），混勻。

　　2. 稱(chēng)取剪碎的新鮮樣品0.2g，共3份，分別放入研缽中，加少量石英砂和碳酸鈣粉及2～3ml95%乙醇，研成均漿，再加乙醇10ml，繼續(xù)研磨至組織變白。靜置3～5min。

　　3. 取濾紙1張，置漏斗中，用乙醇濕潤(rùn)，沿玻棒把提取液倒入漏斗中，過(guò)濾到25ml棕色容量瓶中，用少量乙醇沖洗研缽、研棒及殘?jiān)鼣?shù)次，后連同殘?jiān)黄鸬谷肼┒分小?/div>

　　4. 用滴管吸取乙醇，將濾紙上的葉綠體色素全部洗入容量瓶中。直至濾紙和殘?jiān)袩o(wú)綠色為止。后用乙醇定容至25ml，搖勻。

　　5. 把葉綠體色素提取液倒入光徑1cm的比色杯內(nèi)。以95%乙醇為空白，在波長(zhǎng)665nm、649nm下測(cè)定吸光度。

　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算

　　將測(cè)定得到的吸光值代入下面的式子：Ca=13.9665－6.88A649；Cb=24.96A649－7.32A665。據(jù)此即可得到葉綠素a和葉綠素b的濃度（Ca、Cb：mg/L），二者之和為總?cè)~綠素的濃度。后根據(jù)下式可進(jìn)一步求出植物組織中葉綠素的含量：

　　葉綠素的含量（mg/g）= [葉綠素的濃度×提取液體積×稀釋倍數(shù)]/樣品鮮重（或干重）。

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