葉綠素測定儀的工作原理及實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備說明

　　葉綠素測定儀是用來測量葉綠素含量的儀器，葉綠素測定儀測量時(shí)間快速，LCD直接顯示葉綠素值，30個(gè)數(shù)據(jù)，自動(dòng)計(jì)算并顯示平均值。葉綠素測定儀可以即時(shí)測量植物的葉綠素相對(duì)含量（單位SPAD）或‘綠色程度'，從而可以了解植物真實(shí)的硝基需求量并且?guī)椭私馔寥老趸娜狈Τ潭然蚴欠襁^多地施加了氮肥。

 

　　儀器原理

 

　　根據(jù)葉綠體色素提取液對(duì)可見光譜的吸收，利用分光光度計(jì)在某一特定波長測定其吸光度，即可用公式計(jì)算出提取液中各色素的含量。根據(jù)朗伯—比爾定律，某有色溶液的吸光度A與其中溶質(zhì)濃度C和液層厚度L成正比，即A=αCL式中：α比例常數(shù)。當(dāng)溶液濃度以百分濃度為單位，液層厚度為1cm時(shí)，α為該物質(zhì)的吸光系數(shù)。各種有色物質(zhì)溶液在不同波長下的吸光系數(shù)可通過測定已知濃度的純物質(zhì)在不同波長下的吸光度而求得。如果溶液中有數(shù)種吸光物質(zhì)，則此混合液在某一波長下的總吸光度等于各組分在相應(yīng)波長下吸光度的總和。這就是吸光度的加和性。今欲測定葉綠體色素混合提取液中葉綠素a、b和類胡蘿卜素的含量，只需測定該提取液在三個(gè)特定波長下的吸光度A，并根據(jù)葉綠素a、b及類胡蘿卜素在該波長下的吸光系數(shù)即可求出其濃度。在測定葉綠素a、b時(shí)為了排除類胡蘿卜素的干擾，所用單色光的波長選擇葉綠素在紅光區(qū)的大吸收峰。

 

　　實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備

 

　　（一）材料：新鮮（或烘干）的植物葉片。

 

　　（二）儀器設(shè)備：1. 分光光度計(jì)；2. 電子頂載天平（感量0.01g）；3. 研缽；4. 棕色容量瓶；5. 小漏斗；6. 定量濾紙；7. 吸水紙；8. 擦境紙；9. 滴管。

 

　　（三）試劑：96%乙醇（或80%丙酮）；石英砂；碳酸鈣粉。